단백질의 정량

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설명 : 일반생물학 실험 레포트 - 단백질의 정량 ⅰ. 수용액에 녹아있는 단백질의 양을 Bradford assay 방법으로 정량한다. ⅱ. 표준 용액을 이용한 표준 곡선의 작성과 비색정량 법을 습득한다.

1. title 2. objective 3. date 4. introduction ⅰ. Bradford방법 ① 원리 ■ Bradford 방법은 단백질에 발색제를 가하여, 시료의 발색정도와 단백질 표준용액의 발생정도를 비교하여 단백질을 정량하는 방법이다. Bradford용액에는 Coomassie brilliant blue G-250이 들어있는데 이는 dye 역할을 하며, 단백질과 결합한다. 대체로 염기성과 방향성 아미노산과 결합하는데 이 때 이 dye의 최대 흡광은 465nm에서 595nm로 이동한다. 따라서 붉은색에서 푸른색을 띠게 되는데 이는 단백질 농도가 높을수록 즉, dye가 단백질과 많이 결합할수록 푸른색이 짙어진다. ② 장단점 ■ 발색이 되기까지의 시간이 2분정도로 짧으며, 착화합물의 시간은 1시간 정도이다. ■ 시약 안에 Triton X -100, 알칼리 완충용액, SDS 가 있으면 방해를 받는다. ■ Bradford 방법을 이용한 측정범위는 2 μg/ml ~ 120 μg/ml 이므로 실험 전 희석이 필요하다. ■ 단백질마다 bradford assay와 결합하는 정도가 다르다. . . . . 5. method 6. result 7. discussion 8. reference

출처 : 해피레포트 자료실